Анашкина А.А.1, Копылова С.В.1, Сокольский С.С.2
1 Нижегородский государстенный университет им. Н.И. Лобачевского
2 ОППХ «Краснополянское»

Среди причин, вызывающих изменение нормального гомеостаза, одно из главных мест занимает эндогенная интоксикация (ЭИ), которая может сопутствовать основному заболеванию и нередко служит причиной смертельных исходов. За последнее столетие наука и медицина прогрессировали с огромной скоростью. Однако до сих пор не найдены методы, которые помогли бы эффективно бороться с ЭИ и ее последствиями при лечении заболеваний дыхательной системы, в частности отека легких (ОЛ). Кроме того, многие искусственно синтезированные препараты имеют серьезные побочные эффекты, могут вызывать аллергии.

Исходя из этого, разработка и внедрение систем детоксикации организма природного происхождения – один из актуальных путей лечения ЭИ. При этом продукты пчеловодства и препараты на их основе, такие как маточное молочко и прополис, занимают ведущее положение благодаря своим антиоксидантным, противовоспалительным, биостимулирующим и др. свойствам. Практически не изучена возможность комплексного использования названных продуктов.

В соответствии с этим, на кафедре физиологии и биохимии человека и животных Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского был разработан препарат (патент РФ 21740002 от 15.09.2000) – водно-спиртовая суспензия маточного молочка и прополиса. Рабочее название препарата – Апингалин. Ранее нами было установлено, что курсовая ингаляция Апингалина способствует повышению воздухопроходимости крупных и средних бронхов, улучшает спирометрические характеристики легких при их хронических неспецифических заболеваниях [1]. Мы полагаем, что этот эффект может быть связан с непосредственным влиянием препарата на эпителиальную ткань с соответствующим улучшением структуры сурфактанта, уменьшением вязкости мокроты, а также с биологическим действием компонентов маточного молочка и прополиса на гладкую мускулатуру бронхов с соответствующим расслаблением мышц. Однако следует учитывать также и возможность опосредованного действия Апингалина при его резорбции в кровоток. Поэтому целью данной работы явилось изучение влияния препарата «Апингалин» на уровень эндогенной интоксикации при отеке легких у крыс.

Для достижения поставленной цели были исследованы кровь и моча лабораторных крыс-самцов массой 150-200 г. Животные были разделены на группы:
1) интактные животные;
2) животные с адреналовым ОЛ (0.5мг/кг) – контрольная группа;
3) животные с адреналовым ОЛ (0.5мг/кг), которым проводились ингаляции препаратом – опытная группа.

Изменения показателей плазмы при ОЛ и курсовой ингаляции препарата оценивали по содержанию общего белка, альбумина, диеновых конъюгатов, оснований Шиффа, соотношению фракций фосфолипидов (ФЛ), уровню веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ). В эритроцитах – по уровню ВНСММ и сорбционной емкости (СЕЭ). В моче – по содержанию ВНСММ. Анализы проводились стандартными биохимическими методами. Результаты опытов обрабатывали статистически с применением t-критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони.

Ранее нами было показано, что после моделирования альтерации у крыс контрольной группы развивался отек легких [2]. В результате заполнения альвеол жидкостью в легких нарушался газообмен, а следовательно, развивалась гипоксия. Из-за недостатка кислорода в организме нарушался энергетический обмен, что послужило стимуляцией перекисного окисления липидов (ПОЛ). Это подтверждалось повышением в плазме крови уровня диеновых конъюгатов на 61,2% и оснований Шиффа на 8,7% по сравнению с интактной группой (рис.1).

* – статистически значимые различия (р<0.05) по отношению к контрольной группе. 

Повышение интенсивности свободнорадикальных процессов приводило к возникновению радикалов, промежуточных и конечных продуктов реакций, поврежденных молекул и мембран клеток. Данные вещества являются эндогенными токсинами, вышедшими из источника образования. В процессе развития ОЛ происходили разрушения стенок альвеол и прилегающих капилляров. В кровь выбрасывались лизосомальные ферменты, в том числе протеиназы, регуляторные вещества, «обломки», метаболиты и т.д. Многие из них сами по себе являются токсинами. Ферменты разрушают биомолекулы, запускают процессы протеолиза белков. Образовавшиеся вещества также являются эндотоксинами. Большинство их входят в пул ВНСММ [3,4]. Действие эндотоксинов осуществляется путем прямых или опосредованных механизмов взаимодействия с эффекторными органами, клетками, субклеточными структурами и биополимерами [5]. В результате данных взаимодействий возникают вторичные токсические продукты. В то время как в организме наблюдаются биохимические нарушения. По нашим данным, у контрольной группы крыс происходит снижение концентрации общего белка плазмы на 44,5% (рис. 1) за счет повреждения его токсинами и протеиназами. Из-за перекисноокислительных процессов в составе ФЛ плазмы повышалась доля лизоформ фосфотидилхолина (мембранодеструктивная фракция) на 87,5% на фоне снижения доли фосфотидилхолина, сфингомиелина, и фосфотидилэтаноламина (мембраностабилизирующие фракции) на 36.4%, 5.9% и 3.8% (рис. 2), соответственно.

Примечание: ЛФХ – лизоформы фосфатидилхолина, СМ – сфингомиелин, ФХ – фосфатидилхолин, ФЭА –
фосфатидилэтаноламин (ФЭА).
* — статистически значимые различия (р<0.05) по отношению к контрольной группе.
* — статистически значимые различия (р<0.05) по отношению к контрольной группе. 

Гидрофобные эндотоксины в плазме находятся практически полностью в связанном состоянии с альбумином и мембранами эритроцитов [4]. В норме переносчики связываются с молекулой-мишенью обратимо. Однако некоторые эндотоксины способны взаимодействовать с рецепторами или связывающими центрами необратимо [5]. Следовательно, возрастает скорость деградации альбумина в печени, что сильно уменьшает его концентрацию в плазме крови на 40,6%. Неспособные справляться с большим количеством метаболитов эритроциты резко снижают свою сорбционную емкость, по нашим данным на 67,5% (рис. 1), вследствие накопления на их поверхности ВНСММ (содержание повышается на 68,5%). В результате, в плазме возрастает концентрация эндотоксинов на 16,3%, по сравнению с интактной группой (рис. 3).Из-за токсического повреждения большим количеством ВНСММ нарушаются процессы их детоксикации и выведения, что отражается снижением концентрации ВНСММ в моче на 58,3%. А это, в свою очередь, способствует накоплению этих веществ в организме.

* — статистически значимые различия (р<0.05) по отношению к контрольной группе. 

Таким образом, процесс переходит в III стадию развития ЭИ – фаза полного насыщения [6].

Наши данные свидетельствуют о достаточно высоком уровне эндотоксикоза. Поэтому для улучшения состояния больного и сокращения сроков выздоровления необходимо проводить детоксикационные мероприятия. После введения животным опытной группы адреналина у них, как и у контрольной группы, развивался ОЛ. Однако после курса ингаляций в легких наблюдались видимые улучшения [2]. Благодаря значительному восстановлению тканей легких снижался выброс в кровь первичных эндогенных токсинов, таких как поврежденные биополимеры, лизосомальные ферменты, регуляторные компоненты, метаболиты и т.д. Очищение большинства альвеол от жидкости способствовало восстановлению газообмена в них, а, следовательно, и энергетического баланса всего организма. Кроме того, компоненты препарата обладают мощными антиоксидантными свойствами, способны поглощать свободные радикалы [1,7,8]. Это, в свою очередь, снижало активность ПОЛ, что выражалось в понижении концентрации вторичных конъюгатов на 41,5% и оснований Шиффа на 8,0% по сравнению с контрольной группой (рис. 1).

Таким образом, уменьшалась интенсивность повреждения свободными радикалами биополимеров и мембран. То есть, курс ингаляций исследуемым препаратом снижал выброс первичных токсинов из патологического источника в кровь. Благодаря этому, транспортные системы крови могли справиться с поступающим объемом эндотоксинов и доставить их к местам детоксикации и выведения практически без повреждения сопутствующих структур, что выражалось в увеличении концентрации альбумина в плазме на 40,1%, повышении СЕЭ на 48,8% и нормализации распределения ВНСММ между плазмой, эритроцитами и мочой по сравнению с группой «контрольная» (рис. 1). Так уровень ВНСММ эритроцитов снижался на 50,5% по сравнению с контролем, плазмы – почти в 3 раза, мочи – повышался на 80,5% (рис. 3). Это свидетельствовало об усиленном удалении токсинов из организма. Соответственно, снижалась вероятность образования вторичных эндотоксинов.

Библиография
1. Крылов В.Н. и др. Теория и средства апитерапии. М: ГНУ НИИП Россельхозакадемия, 2007. 296 с.
2. Копылова С.В., Пашкина А.А., Старателева Ю.А. Влияние препарата «Апингалин» на некоторые показатели эндогенной интоксикации при отеке легких у крыс. // Вестник Нижегородского государственного университета им. Н.И.Лобачевского, 2010. №2 (2). С. 532-536.
3. Козлов С.С., Ахмедова М.Д., Захидова Н.А. Синдром эндогенной интоксикации у детей, больных смешанными кишечными паразитозами. // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2010. №1. С.17-19.
4. Осадчая О.И. Pоль энтеросорбции в лечении метаболической интоксикации у больных с тяжелыми ожогами. // Здоровье Украины. 2009, № 6/1. С. 33.
5. Федорова О.В., Федулова Э.Н., Тутина О.А., Коркоташвили Л.В. К вопросу о патогенезе воспалительных заболеваний кишечника у детей, коррекция терапии. // Поликлиника. 2011. №1. С. 60-63.
6. Добротина Н.А., Копытова Т.В. Эндоинтоксикация организма человека: методологические и методические аспекты. Учебное пособие. НН.:2004. 62 с.
7. Radhakrishnan Padmavathi, Palaniyandi Senthilnathan, Dechen Chodon, Dhanapal Sakthisekaran. Therapeutic effect of paclitaxel and propolis on lipid peroxidation and antioxidant system in 7,12 dimethyl benz(a)anthraceneinduced breast cancer in female Sprague Dawley rats. //Life Sciences, 2006. №78. Р. 2820 – 2825.
8. Mok-Ryeon Ahn, Kazuhiro Kunimasa, Shigenori Kumazawa, Tsutomu Nakayama, Kazuhiko Kaji, Yoshihiro Uto, Hitoshi Hori, Hideko Nagasawa,Toshiro Ohta. Correlation between antiangiogenic activity and antioxidant activity of various components from propolis. // Mol. Nutr. Food Res, 2009. № 53. Р. 643 – 651.